當(dāng)前位置:北京百奧創(chuàng)新科技有限公司>>產(chǎn)品>>培養(yǎng)基>> PRS-PCM-2DPRECEDO胰腺癌類器官培養(yǎng)基
產(chǎn)品名稱:PRECEDO胰腺癌類器官培養(yǎng)基(Human Pancreatic Carcinoma Cell Medium)
產(chǎn)品說明:PRECEDO胰腺癌類器官培養(yǎng)基(Human Pancreatic Carcinoma Cell Medium)是一種為促進胰腺癌原代細胞體外生長而設(shè)計的培養(yǎng)基,。它是一種無菌的液體混合系統(tǒng),含有必需和非必需的氨基酸,、維生素,、有機和無機化合物、激素,、生長因子,、微量礦物質(zhì)等。培養(yǎng)基基于碳酸氫鹽的緩沖體系,,在5%CO2/95%空氣的培養(yǎng)箱中平衡時,,pH值為7.4。該培養(yǎng)基的配方可以提供一個理想平衡的營養(yǎng)環(huán)境,,選擇性地促進體外人胰腺癌原代細胞的生長,。
產(chǎn)品優(yōu)勢:
(1) 培養(yǎng)成功率高

(2) 體外持續(xù)擴增

(3) 保持腫瘤原始病理特征

(4) 藥敏結(jié)果與臨床數(shù)據(jù)接近

使用說明:
?使用前準備
(1)DMEM/F12培養(yǎng)基稀釋后的基質(zhì)膠(Corning#356231)(100倍稀釋,現(xiàn)配現(xiàn)用),。
(2)15mL無菌離心管,、移液器、移液管,、無菌槍頭等表面消毒后放入超凈工作臺中紫外照射30min,。
(3)提前30min從4℃冰箱取出*培養(yǎng)基平衡至室溫。
?胰腺癌原代細胞培養(yǎng)
(1)至少提前半小時使用稀釋后的基質(zhì)膠預(yù)鋪培養(yǎng)瓶/板,,使用前吸干基質(zhì)膠,,用稀釋液潤洗一遍,。
(2)將分離并計數(shù)后的細胞懸液參考表1中細胞數(shù)量接種于培養(yǎng)瓶/板,補加*培養(yǎng)基至所需體積,,輕搖晃混勻,,表面消毒后放置培養(yǎng)箱,37℃,、5%CO2條件培養(yǎng),。
(3)原代細胞初次接種后2-3天內(nèi)勿動(利于細胞貼壁),第一次換液建議換半液,。
?胰腺癌原代細胞傳代
(1)鏡下觀察細胞形成克隆,,且匯合度達到80~90%時即可傳代。
(2)培養(yǎng)箱中取出細胞,,棄舊培養(yǎng)液,,加入0.25%yimie洗滌30秒后吸盡,再加入適量0.05%yimei,,37℃孵育,,5min后拿出輕拍培養(yǎng)瓶/板側(cè)面,顯微鏡下觀察細胞消化情況,。
(3)細胞消化至細胞變圓并開始脫落時用終止培養(yǎng)基終止消化,,并將細胞轉(zhuǎn)移至離心管中,1500rpm離心3 min,。
(4)棄上清,,以1-2mL*培養(yǎng)基重懸細胞,活細胞計數(shù),,將細胞懸液按適合的細胞密度接種于培養(yǎng)瓶/板,,補加*培養(yǎng)基至所需體積,輕輕搖晃混勻,,表面消毒后置培養(yǎng)箱,,37℃、5% CO2條件培養(yǎng),。其他步驟同上,。
注意事項:
1.本產(chǎn)品在使用前需平衡至室溫。
2.使用產(chǎn)品時應(yīng)注意無菌操作,,避免污染,。
3.本產(chǎn)品中含低濃度血清和原代細胞專用抗生素,如無特殊需要無需額外添加血清和抗生素,。
4.為保持本產(chǎn)品的理想使用效果,,不宜將其過夜放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
5.樣本需為胰腺癌術(shù)中樣本,且腫瘤細胞比例越高(至少>50%),,培養(yǎng)成功率越高,,不推薦用于少量樣本(如穿刺或者循環(huán)腫瘤細胞)的培養(yǎng)。
6.請于保質(zhì)期內(nèi)使用本產(chǎn)品,,超出保質(zhì)期,,必須放棄使用。
7.本產(chǎn)品僅用于科研用途,,不能用于體外診斷,。