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當(dāng)前位置：北京百奧創(chuàng)新科技有限公司>>產(chǎn)品>>培養(yǎng)基>> PRS-PCM-2DPRECEDO胰腺癌類器官培養(yǎng)基
產(chǎn)品名稱：PRECEDO胰腺癌類器官培養(yǎng)基（Human Pancreatic Carcinoma Cell Medium）
產(chǎn)品說明：PRECEDO胰腺癌類器官培養(yǎng)基（Human Pancreatic Carcinoma Cell Medium）是一種為促進胰腺癌原代細胞體外生長而設(shè)計的培養(yǎng)基,。它是一種無菌的液體混合系統(tǒng)，含有必需和非必需的氨基酸,、維生素,、有機和無機化合物、激素,、生長因子,、微量礦物質(zhì)等。培養(yǎng)基基于碳酸氫鹽的緩沖體系,，在5%CO2/95%空氣的培養(yǎng)箱中平衡時,，pH值為7.4。該培養(yǎng)基的配方可以提供一個理想平衡的營養(yǎng)環(huán)境,，選擇性地促進體外人胰腺癌原代細胞的生長,。
產(chǎn)品優(yōu)勢：
(1) 培養(yǎng)成功率高
(2) 體外持續(xù)擴增
(3) 保持腫瘤原始病理特征
(4) 藥敏結(jié)果與臨床數(shù)據(jù)接近
使用說明：
?使用前準備
（1）DMEM/F12培養(yǎng)基稀釋后的基質(zhì)膠（Corning#356231）（100倍稀釋，現(xiàn)配現(xiàn)用）,。
（2）15mL無菌離心管,、移液器、移液管,、無菌槍頭等表面消毒后放入超凈工作臺中紫外照射30min,。
（3）提前30min從4℃冰箱取出*培養(yǎng)基平衡至室溫。
?胰腺癌原代細胞培養(yǎng)
（1）至少提前半小時使用稀釋后的基質(zhì)膠預(yù)鋪培養(yǎng)瓶/板,，使用前吸干基質(zhì)膠,，用稀釋液潤洗一遍,。
（2）將分離并計數(shù)后的細胞懸液參考表1中細胞數(shù)量接種于培養(yǎng)瓶/板，補加*培養(yǎng)基至所需體積,，輕搖晃混勻,，表面消毒后放置培養(yǎng)箱，37℃,、5%CO2條件培養(yǎng),。
（3）原代細胞初次接種后2-3天內(nèi)勿動（利于細胞貼壁），第一次換液建議換半液,。
?胰腺癌原代細胞傳代
（1）鏡下觀察細胞形成克隆,，且匯合度達到80~90%時即可傳代。
（2）培養(yǎng)箱中取出細胞,，棄舊培養(yǎng)液,，加入0.25%yimie洗滌30秒后吸盡，再加入適量0.05%yimei,，37℃孵育,，5min后拿出輕拍培養(yǎng)瓶/板側(cè)面，顯微鏡下觀察細胞消化情況,。
（3）細胞消化至細胞變圓并開始脫落時用終止培養(yǎng)基終止消化,，并將細胞轉(zhuǎn)移至離心管中，1500rpm離心3 min,。
（4）棄上清,，以1-2mL*培養(yǎng)基重懸細胞，活細胞計數(shù),，將細胞懸液按適合的細胞密度接種于培養(yǎng)瓶/板,，補加*培養(yǎng)基至所需體積，輕輕搖晃混勻,，表面消毒后置培養(yǎng)箱,，37℃、5% CO2條件培養(yǎng),。其他步驟同上,。
注意事項：
1.本產(chǎn)品在使用前需平衡至室溫。
2.使用產(chǎn)品時應(yīng)注意無菌操作,，避免污染,。
3.本產(chǎn)品中含低濃度血清和原代細胞專用抗生素，如無特殊需要無需額外添加血清和抗生素,。
4.為保持本產(chǎn)品的理想使用效果,，不宜將其過夜放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
5.樣本需為胰腺癌術(shù)中樣本，且腫瘤細胞比例越高（至少>50%）,，培養(yǎng)成功率越高,，不推薦用于少量樣本（如穿刺或者循環(huán)腫瘤細胞）的培養(yǎng)。
6.請于保質(zhì)期內(nèi)使用本產(chǎn)品,，超出保質(zhì)期,，必須放棄使用。
7.本產(chǎn)品僅用于科研用途,，不能用于體外診斷,。
